Очень полезная информация. Как известно, культуры клеток, одна из самых успешных и многообещающих альтернатив опытам на животных.
Вы часто могли сталкиваться с высказываниями, что культуры клеток не могут быть этичными , поскольку в питательной среде для нее используется сыворотка крови телят.
Однако это далеко не так. 

http://humane.org.ru/node/106

КЛЕТОЧНАЯ КУЛЬТУРА БЕЗ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ (СЕРУМА) - ЭТИЧНЫЙ, ИСТИННО НАУЧНЫЙ И ЭКОНОМИЧЕСКИ ВЫГОДНЫЙ ВАРИАНТ.
 
 
   Технология исследований на основе культуры клетки применяется практически во всех областях биомедицинских исследований и экспериментов. С самых первых дней эта технология включает в себя использование  сыворотки крови животных для обеспечения питательной среды, а также для других причин. Эта практика продолжается и по сей день, несмотря на низкую техническую эффективность использования сыворотки, ее высокую стоимость и на все увеличивающийся выбор альтернатив без животной плазмы и сыворотки крови. 
   Растущая обеспокоенность фактом причинения страданий животным ради получения сыворотки их крови обусловлена также этическими соображениями в пользу ухода от использования данного материла как среды для культивирования клеточных культур.
 
ПОЛУЧЕНИЕ СЫВОРОТКИ ИЗ КРОВИ ЕЩЕ НЕ РОДИВШИХСЯ ТЕЛЯТ.

   В то время как сыворотка может быть получена от различных видов животных, наиболее предпочтимым источником считаются еще не родившиеся телята. Сыворотка крови приготавливается из крови телят от забиваемых на бойне беременных коров. Теленок извлекается из тела коровы после вспарывания ее брюшной части, обмывается, пуповина обрезается, и затем  при помощи иглы, введенной в сердце плода, из него производится забор крови - без какой-либо анестезии. 
   В последние годы повысилась озабоченность тем, что зародыш испытывает страдания и чувствует боль, а также накопился достаточный объем доказательств, показывающих, что мозг млекопитающих устойчив к аноксии, или повреждению при родах. Таким образом, телята, извлеченные из чрева матери, вполне возможно, находятся в полном сознании, и их головной мозг нормально функционирует. Таким образом, во время процедуры извлечения крови через введенную в сердце эмбриона иглу, скорее всего, он испытывает страдания до момента наступления смерти. 
   По оценкам, от одного до двух миллионов эмбрионов коров ежегодно подвергаются этому процессу, в то время как огромное количество ученых, регулярно использующих сыворотку крови этих животных, не имеют понятия о том, какие страдания причиняет процесс забора крови. 
 
ТЕХНИЧЕСКИЕ СООБРАЖЕНИЯ В ПОЛЬЗУ ОТКАЗА ОТ СЫВОРОТКИ КРОВИ. 
 
   Сыворотка крови животных остается в большой степени неизученным комплексом различных компонентов, из которых на настоящий момент определены около 200. Воздействие этих неизученных компонентов на культуру клетки пока не до конца понятно, и существуют некоторые доказательства, что в сыворотке присутствуют цитотоксины, производящие негативное воздействие на первичные и установившиеся клеточные линии.  
   Состав сыворотки может очень сильно варьировать. Поэтому лаборатории вынуждены анализировать каждую партию серума перед его использованием - процесс как дорогостоящий, так и занимающий большое количество времени. Значительные различия состава партий сыворотки затрудняют контроль за состоянием культур клеток. Также различные партии серума могут давать неодинаковые результаты в пробах клеточных линий. 
   В дополнение к вышеупомянутому, сыворотка может также создавать благоприятную среду для различных загрязнителей, таких как вирусы, бактерии, прионы и микоплазмы. 
   Высокая стоимость сыворотки (качественная сыворотка крови животного может стоить до 500 фунтов стерлингов = 22500 рублей за литр) также говорит в пользу использования альтернатив в исследованиях на культуре клетки. А  неравномерные по времени поставки иной раз приводят к дефициту серума. 
   По некоторым оценкам, 55% общей стоимости экспериментирования на культурах клеток приходится на сыворотку, в то время как последняя составляет только 5% питательной среды.  
 
КУЛЬТУРА КЛЕТКИ БЕЗ СЫВОРОТКИ КРОВИ. 
 
   В идеале для культуры клеток требуется определенная среда с неизменными свойствами. В прошлом исследователи столкнулись с рядом трудностей при попытках культивировать клетки без сыворотки. 
   В настоящее же время все увеличивающееся количество компаний производят питательную среду без сыворотки крови. В такой среде можно успешно культивировать широкий спектр различных типов клеток без потери их жизнеспособности.. 
   Focus on Alternatives (FOA, Фокус на альтернативы) - группа, объединяющая организации, которые пропагандируют альтернативы экспериментам на животных, провела анализ существующих рыночных возможностей  приобретения питательной среды без сыворотки крови для клеточных культур. 
   На момент исследования было найдено 28 компаний, производящих целый диапазон питательных сред без сыворотки для культур клеток. Диапазон предлагаемых питательных сред без сыворотки крови для различных типов клеток весьма широк. С недавнего времени исследованиям в этой области уделяется особое внимание благодаря крупномасштабному производству биофармацевтических препаратов, для которых необходима идеально чистая среда, что, в свою очередь, означает применение питательных сред без серума. 
   Ряд питательных сред без сыворотки был разработан и адаптирован для поддержания специфических типов клеток, например, таких как коммерчески важные клеточные линии  CHO, Vero, MDCR, а также гибридомы моноклональных антител. Другие среды разрабатываются для культур общего применения, и они могут поддерживать широкий круг клеток, используемых для исследований. 
   Даже те питательные среды, которые разработаны для специфических целей, часто могут быть использованы в более широком круге исследований. Некоторые компании прилагают информацию своих клиентов об успехе применения сред для других типов клеток в дополнение к тем, для которых продукт был создан изначально. 

СОСТАВ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД, НЕ СОДЕРЖАЩИХ СЫВОРОТКУ КРОВИ (СЕРУМ).  
 
   Некоторые производители предлагают заменители сыворотки крови животных, которые могут быть добавлены в культуру питательной среды вместо серума. Но, в основном, компании выпускают уже готовую, полностью свободную от сыворотки крови, питательную среду с сопроводительными инструкциями, как "приучить" клетки к среде без серума. 
   Большинство питательных сред состоит из основы, к которой добавляются различные компоненты (аминокислоты, специфические добавки, витамины, ускорители роста и т.д.), которые могут быть либо животного происхождения, либо взятыми от человека, либо комбинациями двух предшествующих, а также добытыми из растительных источников. 
   По определению, среда без сыворотки крови не включает в себя цельный серум, но может включать его производные.  Например, белковый компонент среды без сыворотки является альбумином серума теленка. 
   Организация "Фокус на альтернативы" (FOA) пока недостаточно обратила внимание на другие компоненты, изготовленные на животной основе; ее основной заботой является забор крови из                       эмбрионов коров. Продукты, полученные из взрослых животных, могут порой вызывать меньше страданий, но предпочтение отдается продуктам, полностью свободным от животных компонентов. 
   Многие компании представляют детальный состав  питательных сред без серума для интересующихся исследователей.  Некоторые публикуют список ингредиентов на своих сайтах.  Однако в условиях конкуренции рынка, когда  на питательные среды без животной сыворотки (серума) наблюдается повышенный спрос, отдельные компании, выпускающие среды без серума, держат список ингредиентов своей патентованной продукции в секрете.  Это является затруднением для тех исследователей, которые ищут продукцию, полностью свободную от животных компонентов, а не только от серума. 
  
 
ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ БЕЗ ЖИВОТНЫХ КОМПОНЕНТОВ. 
 
   Наиболее чистая и постоянная по составу питательная среда для культуры клеток - это среда с четко определенными ингредиентами и полностью свободная от животных компонентов. 
   Такие полностью постоянные по составу среды, не содержащие каких-либо животных компонентов, способны поддерживать различные виды клеток, включая клетки HeLa, клетки рака груди, клетки почек, CHO, стволовые клетки, клетки островков Лангерганса, а также гибридомы для производства моноклональных антител. 
   В производстве клеточных культур, используемых для биофармацевтических препаратов клинического применения, особенно важно использовать как можно более чистую питательную среду.  Существует несколько компаний, чья продукция ориентирована на этот аспект.  Компания Hyclone имеет производственную площадь, обозначенную "без компонентов животного происхождения", а компания Gibco Invitrogen располагает компьютерной базой данных сырья, позволяющей ее клиентам распознавать компоненты животного происхождения. 
   На настоящий момент примерно одна треть продуктов биотехнологии приходится на моноклональные антитела, которые по обычаю выращивают в среде с довольно высокой концентрацией серума - сыворотки крови животных (5-20%).  Вместе с тем несколько компаний предлагают для продажи специально созданные без серума питательные среды для гибридом, которые производят повышенное количество моноклональных антител, а также упрощают производство по сравнению с предыдущими средами, содержащими сыворотку. 
 
ОТЛУЧЕНИЕ КЛЕТОК ОТ СРЕДЫ С СЫВОРОТКОЙ КРОВИ И ИХ ВЫРАЩИВАНИЕ В НОВЫХ УСЛОВИЯХ. 
 
   Чтобы заставить клетки расти в среде без сыворотки животной крови, обычно применяется метод постепенного отлучения.  Компания Cambrex считает, что некоторые культуры клеток могут довольно быстро приспосабливаться к питательной среде без серума, если клетки подвергнуть осаждению и затем опять размешать  в среде без сыворотки.  Как правило, чем чище среда с низким содержанием или отсутствием белка, тем больше внимания надо уделять процессу отлучения. 
   Некоторые компании предлагают ограниченный диапазон клеток, уже приспособленных к их продукции, питательной  среде без серума. Например, Gibco Invitrogen поставляет клеточные линии почек человеческого эмбриона, CHO, COS-7L, первичные кератиноциты человека, а также различные клеточные линии насекомых, уже приспособленных к среде без серума. 
   Во время отлучения необходимо наблюдать за клеточным функционированием, так как изменения условий среды могут влиять на различные аспекты клеточной деятельности, которые иной раз могут быть теми аспектами, которыми интересуется исследователь. 
   Тем не менее, те преимущества, которые даст переход к новому методу, как правило, вполне оправдывают усилия, потраченные на переход. 
   Многие компании сообщают, что их питательная среда без сыворотки крови животных может помочь дать лучшие результаты, чем при помощи аналогичных сред с серумом.  Они предлагают сравнительный анализ данных, из которого видно, что для определенных видов клеток их выход  либо сравним,  либо превосходит выход клеток, выращенных в среде с серумом, по плотности клеточной массы или по большему выходу клеток. 
   После того, как клетки приспособятся к новой среде, исследователи оказываются в более выгодной позиции, так как облегчается контроль  клеточной культуры, устраняется вмешательство загрязнителей, улучшается плодовитость культуры, устраняется цитотоксичность от сыворотки животной крови, и постоянная по составу питательная среда не требует анализа каждой партии. 
 
БУДУЩЕЕ БЕЗ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ НЕ РОДИВШИХСЯ ТЕЛЯТ (FCS -Fetal Calf Serum). 
 
   Организация "Фокус на альтернативы" (FOA) стремится к тому, чтобы прекратить широко распространенное применение серума зародышей. Компания убеждена, что уже имеющиеся на рынке  продукты без серума в сочетании с новыми разработками могут положить конец использованию сыворотки крови эмбрионов коров. 
   К этому подталкивают как моральные, так и законодательные требования: European Directive 86/609/EEC (Европейская Директива) обязывает ученых использовать альтернативы везде, где они возможны. 
   Уже сейчас культура клеток показала себя как важная альтернатива процедурам тестирования на живых животных. К примеру, производство вакцины от полиомиелита, осуществленное с помощью культур клеток, спасло жизнь тысячам обезьян, а in vitro (пробирочное) производство моноклональных антител заменило процесс выращивания их в живых мышах. 
   Вполне очевидно, что методы использования клеточных культур играют важную роль в области альтернатив, и исключение применения сыворотки крови животных, в частности сыворотки крови коровьих эмбрионов, сделают эту роль еще более значимой для уменьшения использования животных.

   Экономические причины и требования безопасности заставили биофармацевтическую индустрию переходить на производство в условиях использования питательных сред без серума, и это, в свою очередь, проложило путь для интереса со стороны биомедицинских исследований. 
   Отлучение клеток от питательной среды, содержащей сыворотку животной крови, и перевод на среду без серума могут стоить исследователям определенных усилий, но они будут многократно оправданы последователями и качеством результатов. 
   Компания "Фокус на альтернативы" (FOA) призывает всех пользователей клеточных культур сделать попытку для перехода на питательные среды без сыворотки крови. 
 
Связаться с "Фокусом на Альтернативы" (FOA) можно по адресу: 
carol@drhadwentrust.org.uk или через веб-сайт 
www.focusonalternatives.org.uk